丁酸梭菌 KCTC1871
【编号】:H1676 【产品名称】:丁酸梭菌 KCTC1871 【规格】:支 【用途】:
附表1 菌种与培养和保存方法对应表冻干菌株复苏方法
附表2 培养基、培养条件和保存方法
方法1:
无菌条件下,用无菌吸管往西林瓶冻干菌粉中加入脑心浸液培养基,充分悬浮后取适量的菌悬液于营养琼脂(022020)斜面上35-37℃划线培养24-48h。斜面(第一代)放于4℃冰箱保存,每个月转接一次,代数以此类推,建议使用菌种代数不超过5代,5代后菌种应销毁。
方法2:
无菌条件下,用无菌吸管往西林瓶冻干菌粉中加入脑心浸液培养基,充分悬浮后取适量的菌悬液于营养琼脂(022020)斜面上划线35-37℃培养24-48h。斜面(第一代)放于25℃下保存,每个月转接一次,代数以此类推,建议使用菌种代数不超过5代,5代后菌种应销毁。
方法3:
无菌条件下,用无菌吸管往西林瓶冻干菌粉中加入脑心浸液培养基,充分悬浮后取适量的菌悬液于血平板(024070)后涂布,35-37℃培养24-48h。平板(第一代)放于4℃冰箱保存,并用封口膜或其它封条密封平板,每半个月转接一次,代数以此类推,建议使用菌种代数不超过5代,5代后菌种应销毁。
方法4:
无菌条件下,用无菌吸管往西林瓶冻干菌粉中加入脑心浸液培养基,充分悬浮后取适量的菌悬液于胰蛋白胨大豆酵母浸膏琼脂(TSA-YE)(026020)斜面上 35-37℃培养24-48h。斜面(第一代)放于4℃冰箱保存,每个月转接一次,代数以此类推,建议使用菌种代数不超过5代,5代后菌种应销毁。
方法5:
无菌条件下,用无菌吸管往西林瓶冻干菌粉中加入脑心浸液培养基,充分悬浮后取适量的菌悬液于疱肉牛肉粒肉汤(027140)加液体石蜡1cm,35-37℃培养48-72h。肉汤(第一代)放于4℃冰箱环境下保存,每半个月转接一次,代数以此类推,建议使用菌种代数不超过5代,5代后菌种应销毁。
方法6:
无菌条件下,用无菌吸管往西林瓶冻干菌粉中加入碱性蛋白胨水,充分悬浮后取适量的菌悬液于碱性琼脂(025040)斜面上35-37℃培养24-48h。斜面(第一代)放于25℃下保存,每个月转接一次,代数以此类推,建议使用菌种代数不超过5代,5代后菌种应销毁。
方法7:
无菌条件下,用无菌吸管往西林瓶冻干菌粉中加入3%NaCl碱性蛋白胨水,充分悬浮后放置于36℃下复苏8-12小时。取适量的菌悬液于3%NaCl营养琼脂(营养琼脂(022020)加入2.5gNaCl/100mL)斜面上35-37℃培养24-48h。斜面(第一代)放于25℃下保存,每个月转接一次,代数以此类推,建议使用菌种代数不超过5代,5代后菌种应销毁。
方法8:
无菌条件下,用无菌吸管往西林瓶冻干菌粉中加入沙氏液体培养基,充分悬浮后取适量的菌悬液于马铃薯葡萄糖琼脂 (PDA)(021050)斜面25-28℃培养2-5天。斜面(第一代)放于4℃冰箱保存,每两个月转接一次,代数以此类推,建议使用菌种代数不超过5代,5代后菌种应销毁。
方法9:
无菌条件下,用无菌吸管往西林瓶冻干菌粉中加入布氏肉汤,充分悬浮后取适量的菌悬液于血平板(024070)42±1℃微需氧条件下培养48-72h。平板(第一代)放于4℃冰箱微需氧环境下保存,并用封口膜或其它封条密封平板,每个星期转接一次,代数以此类推,建议使用菌种代数不超过5代,5代后菌种应销毁。
方法10:
无菌条件下,用无菌吸管往西林瓶冻干菌粉中加入TPY肉汤,充分悬浮后取适量的菌悬液于BBL琼脂(027330)斜面厌氧环境下35-37℃培养48h-72h。斜面(第一代)放于4℃冰箱厌氧环境下保存,每个星期转接一次,代数以此类推,建议使用菌种代数不超过5代,5代后菌种应销毁。
方法11:
无菌条件下,用无菌吸管往西林瓶冻干粉中加入脱脂奶粉溶液,充分悬浮后取适量的菌悬液于脱脂奶粉溶液(10%)35-37℃培养48h-72h。 菌种(第一代)放于4℃冰箱保存,每两个星期转接一次,代数以此类推,建议使用菌种代数不超过5代,5代后菌种应消毁
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