第二代人细小病毒 B19 核酸检测试剂国家参考品
2nd National Reference Panel for Human Parvovirus B19
Nucleic Acids Detection Kit
【类别】体外诊断试剂参考品
【批号】370119-202301
【性状】淡黄色液体
【用途】本参考品为换代研制。本参考品来源于人体血浆，适用于人
细小病毒 B19 核酸定性或定量检测试剂性能要求的评价：阴性符合
率、阳性符合率、检出限和重复性；检出限参考品 L 也适用于定量检
测试剂盒线性和准确度性能要求的评价。
【组成和规格】本参考品共 25 支样品，组成如下：
参考品类型 编号 规格 浓度
阴性参考品 N1~N10 1mL/支 10 支
阳性参考品 P1~P8 1mL/支 8 支
检出限参考品 L 1mL/支 1 支
重复性参考品 R 1mL/支 1 支
稀释液 L0 1mL/支 5 支
注：重复性参考品 R 浓度为（7.0±0.2）log10 IU/mL（K=2），检出
限参考品 L 浓度为（7.2±0.3）log10 IU/mL（K=2），已溯源至“3rd WHO
International Standard for Parvovirus B19 for Nucleic Acid Amplification
Techniques”（NIBSC code：12-208）。
【使用方法及要求】
1. 使用方法
1）使用时，将参考品取出完全融化后，并混合均匀使用；
2）阴性参考品、阳性参考品作为待测样品直接使用；
3）重复性参考品 R 使用稀释液 L0 或使用 B19 DNA 检测为阴性
的人血浆或血清稀释 1:10、1:10 3 稀释后作为待测样品使用，每个梯
度平行检测 10 次；定量试剂盒也可稀释至临近检出限水平浓度如 1.5
~5×LOD 进行检测。
4）检出限参考品 L 使用稀释液 L0 或使用 B19 DNA 检测为阴性
的人血浆或血清 10 倍梯度稀释至产品技术要求规定的浓度，然后作
为待测样品使用；定量试剂盒也可根据声称检出限要求，稀释至包含
检出限水平浓度附近检测（例如包含检出限浓度、高于声称的检出限
浓度的梯度至少 1 个、低于声称的检出限浓度的梯度至少 1 个）。
以下方法适用于定量检测试剂盒的性能评价：
5）定量用途的试剂盒可进行线性的性能评价，根据试剂盒的线
性范围，将检出限参考品 L 使用稀释液 L0 或使用 B19 DNA 检测为
阴性的人血浆或血清 10 倍/3 倍梯度稀释至少 5 个浓度，其中低值样
品浓度应接近试剂盒线性范围的下限，按照试剂盒说明书操作，计算
检测结果的浓度对数值（或均值）和相应稀释度（或理论含量）的对
数值，将其进行线性拟合，计算其线性相关系数 r；
6）定量用途的试剂盒可进行准确度的评价，将检出限参考品 L
使用稀释液 L0 或使用 B19 DNA 检测为阴性的人血浆或血清稀释至
试剂盒线性范围内的 3 个浓度进行检测，按照试剂盒说明书操作，每
个浓度至少检测 2 次，计算检测结果（浓度对数值，Lg IU/mL）的绝
对偏差。
2. 检测要求
1）阴性符合率：N1~N10 应均为人细小病毒 B19 核酸阴性，阴
性符合率（-/-）为 10/10；
2）阳性符合率：P1~P8 应均为人细小病毒 B19 核酸阳性，，阳性
符合率（+/+）为 8/8；
3）重复性：使用重复型参考品 R（稀释至一个或多个相应浓度）
平行检测 10 次，应均为人细小病毒 B19 核酸阳性，且且其 Ct 值的变
异系数不大于 5.0%。
4）检出限：应在 1.6×10 3 IU/mL(即 1:10 4 稀释时)及以上浓度为阳
性；
建议企业在产品技术要求中制定更高的质量标准（例如：不低于企业
声称检出限水平的稀释度应为阳性；或者，对稀释至相当于试剂盒声
称检出限浓度水平后的检出限参考品进行 20 次检测，应符合声称要
求）。